شناسایی مولکولی و آنالیز فیلوژنتیکی سویه‌های انگل "اکینوکوکوس گرانولوزوس " در روده سگ‌های ولگرد شهر تهران با استفاده از روش PCR-RFLP
کد مقاله : 1421-MVTCONF
نویسندگان
محمد رستمی1، سیامک کاکه خانی2، پرهام حمیدی *3
1دانش آموخته دکترای عمومی دامپزشکی، واحد سنندج ،دانشگاه آزاد اسلامی، سنندج،ایران.
2گروه پاتوبیولوژی، واحد سنندج، دانشگاه آزاد اسلامی، سنندج، ایران
3دانشجوی دکترای عمومی دامپزشکی، واحد سنندج ،دانشگاه آزاد اسلامی، سنندج،ایران
چکیده مقاله
انگل اکینوکوکوس گرانولوزوس یکی از انگل‌های روده باریک گوشتخواران است که به عنوان یک بیماری زئونوز مهم در انسان و سایر علفخواران شناخته می‌شود. تنوع سویه‌های این انگل در جهان اهمیت زیادی در اپیدمیولوژی، کنترل و پیشگیری از این بیماری دارد. این پژوهش با هدف شناسایی مولکولی سویه‌های اکینوکوکوس گرانولوزوس جدا شده از روده سگ‌های ولگرد در شهر تهران و انجام آنالیز فیلوژنتیکی برای تأیید وجود سویه‌های خاص در این منطقه انجام شد. در این مطالعه، ۲۰ کرم بالغ اکینوکوکوس گرانولوزوس از روده سگ‌های ولگرد شهر تهران جمع‌آوری شدند. استخراج DNA با استفاده از کیت MBST انجام شد. سپس، DNA استخراج شده به همراه پرایمرهای طراحی‌شده بر روی ژن ITS1 در واکنش PCR مورد استفاده قرار گرفت. محصولات PCR با استفاده از روش RFLP و آنزیم‌های ALU1، MSP1 و TAQ1 تجزیه شدند. برای نمونه‌های با الگوی برش متفاوت، تعیین توالی ژن ITS-1 انجام شد. بر اساس الگوی برش به دست آمده در این مطالعه، سویه‌های G1-G3 (سنسو استریکیتو) شناسایی گردید و پس از انجام این مراحل تعداد ۵ نمونه از نمونه‌هایی که الگوی برش متفاوت داشتند، تعیین توالی شدند. بر اساس تعیین توالی ژن ITS-1 از نمونه‌ها، چیزی بالغ بر ۹۹٪ همولوژی با سویه G1 که همان سویه گوسفندی است را نشان داد. نتایج این پژوهش وجود سویه گوسفندی G1 (اکینوکوکوس گرانولوزوس) را در روده سگ‌های ولگرد شهر تهران تأیید می‌کند. این یافته‌ها اهمیت کنترل و پیشگیری از این انگل را در منطقه مورد مطالعه نشان می‌دهد.
کلیدواژه ها
کلید‌واژگان: کینوکوکوس گرانولوزوس، تهران، PCR-RFLP، سویه، آنالیز فیلوژنتیکی
وضعیت: پذیرفته شده برای ارائه شفاهی